Objektglass og dekkglass til mikroskopi

Objektglass og dekkglass er to forbruksvarer man raskt undervurderer — helt til man står midt i en prepareringsøkt og innser at kvaliteten avgjør alt. Objektglasset bærer preparatet, dekkglasset beskytter det og gjør skarpe bilder mulig. Uten riktig glass mellom linsen og prøven mister selv et godt mikroskop sitt potensial.

Mål og materialvalg: hva tallene betyr i praksis

Standardobjektglass leveres i 76 × 26 mm, en størrelse som er innarbeidet i alle vanlige mikroskophere og preparatbokser. Tykkelsen ligger som regel på 1,0–1,5 mm. Soda-kalkglass er normen for generell bruk: rimelig, optisk tilstrekkelig klart og kjemisk stabilt nok for de fleste fargeteknikker, inkludert hematoksylin-eosin og Giemsa. Borosilikateglass brukes der man trenger høyere termisk motstandsdyktighet, for eksempel ved in situ-hybridisering med varmetrinn over 90 °C.Dekkglass klassifiseres etter tykkelse. Nr. 1 tilsvarer 0,13–0,16 mm og er standardvalget for de fleste biologiske preparater. Nr. 1.5 (0,16–0,19 mm) er det tykkelsesintervallet de fleste planakromatiske og planapokromatiske 40×- og 100×-objektiver er korreksjonsjustert for — noe produsentene sjelden oppgir tydelig i brosjyrene. Bruker man nr. 1 med et objektiv kalibrert for nr. 1.5, oppstår et lite men målbart sfærisk aberrasjonstap ved høy forstørrelse.

Overflatebehandling og spesialvarianter

Ufrostede objektglass er tilstrekkelig for daglig bruk der merking gjøres med penn direkte på glasset eller via etikett. Frostede objektglass har ett sandblåst område i en ende — praktisk for blyant- eller tusjemerking uten tape, særlig der preparatene sirkulerer mellom flere brukere eller arkiveres over tid. Fargekodet kant (grønn, blå, rød, gul) brukes systematisk i laboratorier der ulike prøveserier må holdes strikt atskilt visuelt.Ladede objektglass — silaniserte eller poly-L-lysin-belagte — er en egen kategori beregnet på vevsseksjoner og cellesuspensjon der adhesjon til glasset er kritisk. De koster opptil ti ganger mer per stk., men forhindrer at seksjoner sklir av under varmetrinn i immunhistokjemi.

Slik velger du riktig dekkglass til preparatet

Størrelse på dekkglasset bør tilpasses preparatets utbredelse, ikke bare objektglassets bredde. Et 18 × 18 mm dekkglass dekker de fleste enkeltpreparater. For brede bloduttryksspreparater eller botaniske snitt på tvers av bladbredden brukes 24 × 50 mm eller 24 × 60 mm. Bruk av et for lite dekkglass tvinger ofte til delvis nedsenkting av objektiv i monteringsmediet — noe som ødelegger optikk og preparat simultant.Nr. 1 (0,13–0,16 mm): daglig lysmikroskopi, enkle biologiprøver, skolebrukNr. 1.5 (0,16–0,19 mm): fluorescensmikroskopi, konfokalmikroskopi, objektiver med høy NANr. 2 (0,19–0,23 mm): spesialtilpassede oppsett, sjelden brukt i standardlaboratorier

Pakningsstørrelser og forbrukslogikk

Objektglass leveres typisk i pakker på 50 eller 100 stk. for enkeltbrukere og hobbyister, og i esker på 500 eller 1 000 stk. for institusjonell bruk. Et aktivt biologilaboratorium med to–tre teknikere forbruker gjerne 200–400 objektglass per måned, avhengig av prøvevolum. Dekkglass har høyere svinn enn objektglass: de er tynnere, knekker lettere, og mange teknikere bytter dem fremfor å rengjøre dem mellom preparater.Oppbevaring i tørr, støvfri esken er avgjørende. Fuktighet fester partikler på glassoverflaten som ikke lar seg tørke bort uten risiko for riper. Åpnede pakker bør forsegles med tape dersom hele esken ikke brukes innen én uke.

Rengjøring og gjenbruk

Objektglass kan rengjøres og gjenbrukes, dekkglass bør i praksis betraktes som engangsartikler. Rengjøring av objektglass gjøres med 70 % etanol og lofritt papir — eller ved ultralydbad i destillert vann i tre minutter etterfulgt av tørking i varmeskap ved 60 °C. Monteringsmedier som Canada balsam løses med xylen; syntetiske medier som Eukitt krever aceton. Merk at gjenbruk av objektglass ikke er egnet i diagnostisk eller klinisk sammenheng der kontaminasjonsrisiko må elimineres.For undervisning og repetitiv generell mikroskopi er gjenbruk derimot fornuftig ressursbruk — ett sett på 100 objektglass kan, ved systematisk rengjøring, holde i ett helt skoleår for en klasse på 30 elever.